淺析多糖的藥理作用論文
目前人們已經(jīng)提出各種學說來解釋機體的衰老、疾病等生理現(xiàn)象,如自由基學說、免疫功能下降學說、生物膜衰老學說、代謝失調(diào)學說等,其中被人們普遍接受的是氧自由基學說,最能解釋機體衰老、生病的機理。研究表明,毒性氧離子包括O2-·,H2O2·OH等,這些毒性氧自由基能夠使細胞膜脂質(zhì)過氧化,增強細胞膜通透性,使細胞內(nèi)容物流出,同時還損傷蛋白質(zhì)和DNA。
多糖具有廣泛的藥理作用,如作為免疫調(diào)節(jié)劑,激活巨噬細胞、T淋巴細胞、LAK細胞等多種免疫細胞,促進細胞因子生成,活化補體,可抗腫瘤、抗病毒、抗感染、抗消化性潰瘍、抗氧化、防衰老、降血糖血脂等,而且毒性相對較低,因此,越來越受到研究人員的視[1]。超濾作為一種新型的分離技術,用于多糖、酶等活性物質(zhì)的分離與純化,收率高且極少破壞,是當前天然多糖分離研究中十分活躍的領域[2]。
蒲公英是菊科舌狀花亞科多年生草本,全草均可入藥,有清熱解毒、止痛散淤等功效,是中醫(yī)臨床上常用的中草藥。蒲公英根、葉、花3種器官的多糖都有一定的`清除自由基的活性[3]。蒲公英多糖的分子量分布稱取30 g蒲公英根粉末加入30倍的水80℃浸提兩次,3 h/次。浸提液經(jīng)抽濾后加水定容至1 500 ml。浸提液中總糖含量為2.14 mg/ml,還原糖的含量為0.31 mg/ml,多糖含量為1.83 mg/ml。根據(jù)上述超濾方法得到蒲公英多糖不同組分多糖分布如圖1所示。由圖1可知,蒲公英多糖分子量大于10 KDa(DP1)占蒲公英多糖的35.50%,分子量在6 KDa與10 KDa之間(DP2)占蒲公英多糖的53.71%,而分子量小于6 KDa(DP3)只占蒲公英多糖的10.79%。本實驗采用多糖分布量較大兩個部分DP1 、DP2繼續(xù)研究它們的清除自由基的活性,DP1 、DP2經(jīng)木瓜蛋白酶和TCA脫蛋白后在260 nm和280 nm處檢測無明顯吸收。
蒲公英多糖清除·OH的作用分別配5 mg/ml DP1、DP2溶液,根據(jù)Fenton反應,其對·OH的清除率見表1及圖2。由表1、圖2可知,蒲公英多糖DP1、 DP2對·OH有清除作用,并隨著多糖加入量的增加清除率上升,即清除率與多糖的用量之間存在一定的量-效關系。其中DP2的清除率高于DP1,當濃度達到5 mg/ml時 DP2的清除率達到61.21%而DP1為49.78%。
本文通過對蒲公英粗多糖超濾分離后,可得到3個組分即DP1、DP2H DP3,其中DP2多糖含量最高,占蒲公英多糖含量的53.71%,對兩個含多糖較多的主要組分DP1和DP2清除羥自由基和超氧陰離子的能力進行了初步研究,顯示兩組分均能清除羥自由基和超氧陰離子,且在本實驗范圍內(nèi)隨多糖濃度的升高,清除能力逐漸加強。其中對羥自由基的清除能力DP2高于DP1,在5 mg/ml時達到61.21%,對羥自由基產(chǎn)生明顯的抑制作用。而對超氧陰離子的清除能力DP1略高于DP2。從總體的清除效果看,二者對羥自由基有較強的清除能力。本文主要通過超濾分離將蒲公英根多糖分為兩個組分,研究并對比了其清除羥自由基和超氧陰離子的活性。
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